LFB染色（Luxol fast blue染色）是神經病理學中特異性顯示髓鞘結構的經典染色技術，其原理基于LFB染料的陽離子特性與髓鞘中酸性脂蛋白的靜電結合。標準染色流程需嚴格控制條件：石蠟切片脫蠟至水后，浸入0.1%LFB染液（60℃預熱）中孵育8-16小時（過夜染色效果比較好），隨后用95%乙醇洗去多余染料；關鍵分化步驟采用0.05%鋰碳酸溶液處理30-90秒，在顯微鏡監控下至白質呈現亮藍色而灰質近乎無色，***用焦油紫或中性紅復染神經元胞體。.甲苯胺藍染色能突出顯示肥大細胞顆粒，在過敏性疾病或肥大細胞增生癥的診斷中具有特異***理切片

特殊染色技術的聯合應用是提高病理診斷精細度的重要策略，通過多染色結果的相互印證，可***解析復雜的組織病理學改變。在肝臟疾病評估中，典型組合包括：① Masson三色染色（藍色膠原纖維）與網狀纖維染色（黑色銀染）聯用，能區分肝硬化（Masson顯示寬大纖維間隔）與肝纖維化（網狀纖維顯示纖細網格）；② PAS染色（紫紅色糖原）聯合淀粉酶消化對照，可鑒別肝糖原貯積癥（淀粉酶敏感）與α-1抗胰蛋白酶缺乏癥（淀粉酶抵抗的嗜酸性小球）。對于血液系統疾病，普魯氏藍染色（藍色鐵沉積）需與Perls-DAB增強法聯用，在骨髓活檢中既能顯示環形鐵粒幼細胞（診斷MDS），又能通過DAB顯色量化鐵負荷程度。病理切片銀染技術如Gomori染色能凸顯網狀纖維分布，在肝*與增生結節鑒別診斷中發揮關鍵作用。

特殊組織處理技巧：對易脫片的腦組織，可在染色前用1%多聚賴氨酸處理載玻片***斑塊建議先進行蘇木精復染（30秒），再油紅O染色以顯示泡沫細胞定位染色失敗補救：對已脫水的切片可用70℃熱PBS處理2分鐘恢復脂質顯色***研究顯示，聯合尼羅紅熒光染色（Ex/Em=488/525nm）可提高微小脂滴（<1μm）的檢出率，尤其適用于非酒精性脂肪肝的早期診斷。實驗室應建立標準操作手冊，明確規定從取材到封片的全流程時間控制（總時長不超過45分鐘），確保染色結果的可重復性。

油紅O染色作為中性脂肪檢測的金標準，其技術難點在于脂肪組織極易在染色過程中溶解丟失。為比較大限度保持脂質完整性，需采取以下系統性防護措施：樣本前處理階段固定后必須流水沖洗12小時以上，徹底***殘留甲醛（甲醛會破壞脂蛋白結構）冰凍切片厚度控制在8-10μm，過薄（<5μm）會導致脂滴破裂預冷載玻片（4℃）上貼片，減少組織回溫造成的脂質擴散染色過程控制采用改良染液配方：0.3%油紅O（60%異丙醇+40%蒸餾水配制），過濾后4℃避光保存（有效期7天）染色缸預冷至10℃，染色時間精確控制在8分鐘（室溫染色時縮短至5分鐘）分化使用60%異丙醇（而非傳統85%濃度），分化時間不超過10秒封片與質控免脫水直接封片：染色后PBS稍沖洗，立即用含5%聚乙烯醇的甘油明膠封固設置雙對照：陽性對照（正常脂肪組織）監測染色效率，陰性對照（異丙醇脫脂處理）驗證特異性數字化分析：采用ImageJ軟件定量染色面積（閾值設定RGB R>180）麗春紅染色可顯示肌肉組織的細微病變，在肌營養不良或肌炎的診斷中具有輔助價值。

該染色在臨床診斷中具有不可替代的價值：①在遺傳性血色病（HH）中，能清晰顯示肝細胞、胰腺腺泡細胞及心肌細胞內彌漫分布的藍色顆粒，鐵定量分析可評估疾病分期；②在含鐵血黃素沉著癥時，可鑒別肺泡巨噬細胞吞噬的含鐵血黃素（藍色陽性）與其他色素沉積；③在骨髓檢查中有助于診斷鐵粒幼細胞性貧血（環形鐵粒幼細胞>15%為診斷標準）。操作中需嚴格控制技術要點：鹽酸濃度過高（>4%）會導致組織水解，而濃度過低（<1%）則降低反應敏感性；亞鐵**鉀溶液需新鮮配制（保質期<1周），若呈現綠色則提示氧化失效；骨髓等富含鐵的組織應縮短染色時間至10分鐘以避免過度染色。現代數字化病理系統可通過分析藍色染色面積實現鐵沉積的半定量評估，為療效監測提供客觀依據。陰性對照需經鐵螯合劑（如去鐵胺）預處理以驗證染色特異性。微流控芯片整合多重染色流程，實現微量樣本的高通量、自動化病理檢測與分析。病理切片

硫黃素T染色在淀粉樣變性的熒光診斷中具有高敏感性，其黃色熒光可作為早期篩查指標。病理切片

蘇木精染色的時間會直接影響細胞核的顯色效果。如果染色時間不足，細胞核可能會呈現灰藍色，導致核結構模糊；如果染色時間過長，細胞核會過度吸收染料，呈現深紫色，甚至會掩蓋核內細節。在實際操作中，需根據組織類型和切片厚度調整染色時間，通常為5-15分鐘。染色后需用1%鹽酸乙醇分化，去除多余染料，再通過溫水或自來水沖洗返藍，使細胞核呈現清晰的藍紫色。分化時間需在顯微鏡下控制，以細胞核染色清楚而細胞質基本無色為佳。病理切片