褐藻寡糖對POD及其同工酶的影響POD是植物體內重要抗逆酶類之一,能夠催化乙烯生物合成,參與氧自由基消除反應,其活力高低通常是表征植物抗逆性能關鍵指標之一。噴施ADO后進行低溫脅迫,濃度為0.05%,0.20%,0.30%ADO組能夠顯著提高POD活力,同工酶譜帶寬度增加,顏色加深,表明POD含量受到ADO誘導而增加;并且0.20%和0.30%濃度組還能夠誘導產生POD同工酶新譜帶,以0.20%濃度ADO誘導效果好;0.10%濃度ADO組24h內POD變化幅度較小且處于較低水。48h后迅速升高,表明葉片內氧自由基含量升高,細胞開始受到損傷;高濃度1.00%ADO組隨低溫脅迫時間延長細胞損傷加劇,POD活力不斷降低。褐藻寡糖水溶性好，易于被吸收利用，也是重要的信號分子，能夠參與植物的生長調節和誘導抗病的過程。遼寧褐藻寡糖凝膠

   因此褐藻寡糖對植物的抗逆機制是通過誘導作用實現的。 誘導植物體內產生各種抗性物質來緩解逆境因素對植物造成的損傷，從而達到抗 逆的目的。為了研究褐藻寡糖與細胞的結合機制與作用規律，利用激光共聚焦技術對標 記的寡糖與細胞進行結合，觀察其動態結合過程，研究發現，褐藻寡糖能夠 與植物的細胞壁進行結合，又可以穿過細胞壁進入細胞內部與細胞膜進行結合。 通過將蛋白酶以及蛋白變性劑 SDS 對膜蛋白進行處理后研究發現能夠對寡糖的 結合產生影響。表明褐藻寡糖的結合是與膜上的蛋白有關。通過封閉細胞膜上的 鈣離子通道，對其進行阻斷后結合寡糖，研究發現，褐藻寡糖與細胞膜的結合與 鈣離子通道無關。浙江褐藻寡糖技術要求褐藻寡糖對杏鮑菇菌絲體生長速度、菌絲體生物量、纖維素酶活性具有促進作用。

    對初步純化的褐藻膠裂解酶進行了酶學性質研究,酶的適反應條件為50℃、pH8,在4～40℃、pH6～8范圍內酶活力較穩定;Ca2+、Mg2+和Fe2+等離子對該酶有促進作用,EDTA、Ba2+、Zn2+等有抑制作用。通過優化獲得褐藻膠的好酶解條件,在底物濃度、加酶量、體系、45℃條件下反應32h時,還原糖生成量為。以提取的褐藻多糖為原材料,按照此酶解工藝大量制備褐藻寡糖,通過Bio-GelP2凝膠色譜柱分離純化,得到不同聚合度的7個寡糖組分F1-F7,TLC分析結果顯示,其聚合度在1-7之間。去除自由基結果表明,褐藻多糖和寡糖都具有較強的抗氧化活性。自由基去除率隨著糖濃度的增加而增強,在寡糖濃度、多糖濃度±±。多糖、寡糖濃度為±±。在相對濕度為85%和62%的環境下,褐藻多糖和褐藻寡糖都表現出較強的吸濕能力,褐藻寡糖更佳。在干燥環境下,褐藻多糖和寡糖都表現出很強的保濕效果,36h時褐藻寡糖的保濕率達到。抑菌結果顯示,褐藻寡糖對白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌均具有較好的抑菌作用,褐藻多糖對白色念珠菌具有抑菌效果,對另3種細菌無抑制。

    馬尾藻是我國南海常見的大型經濟褐藻,也是褐藻多糖的重要來源。褐藻多糖及其降解產物—褐藻寡糖,具有眾多生物活性,在農業、醫藥、化妝品等領域具有廣闊的應用前景。以采自海南瓊海海域的孤囊馬尾藻為研究對象,探究了一種有效提取褐藻多糖和酶解制備褐藻寡糖的方法,并對制備的褐藻多糖及寡糖進行純化、結構分析和活性評價。研究結果如下:采用超聲波輔助熱堿法,通過響應面優化獲得孤囊馬尾藻多糖的比較好提取工藝,在超聲功率500W、料液比1:25、提取時間5.95h、提取溫度82.27℃、NaOH質量分數3.87%的條件下粗多糖得率為41.23%±0.98%。采用TCA沉淀法除蛋白,粗多糖的蛋白去除率達到81.93%,多糖保留率92.17%;優化了H2O2氧化法除色素工藝,在H2O2濃度1.5%、70℃條件下脫色6h時,脫色率達到91.23%,多糖保留率為85.32%。采用DEAE-52離子交換層析柱對初步純化后的多糖進一步分離純化,獲得SOP1、SOP2和SOP3三個多糖組分,并明確了它們的分子量、純度以及總糖、還原糖、蛋白、硫酸根和糖醛酸的含量。采用自主分離的產褐藻膠裂解酶類芽孢桿菌新種,發酵制備粗酶液,發酵液酶活為15.20U/ml。褐藻寡糖作為一種信號分子，還參與調節植物的生長發育能調控生物合成過程從而保護果實品質提高果實的產量。

    AOS增強植株對致病疫霉的抗性用100μg/mLAOS分別噴施擬南芥和本氏煙,24h后,接種致病疫霉。結果顯示與噴施ddH2O的植株相比,AOS處理的葉片接種部位的水漬及葉片的黃化程度明顯降低,檢測致病疫霉菌絲的生長量也明顯低于對照,表明AOS也可以增強植株對致病疫霉的抗性。AOS誘導植物早期免疫應答反應對噴施AOS和ddH2O的本氏煙葉片進行相關免疫反應的檢測。結果顯示,在氣孔開度方面,與ddH2O處理的對照組相比,AOS處理的本氏煙葉片的氣孔開度明顯較低,表明AOS通過調節葉片表面氣孔的開合抑制病原菌的入侵。分別于2h、4h、8h、24h和48h時,對噴施AOS和ddH2O的本氏煙葉片進行DAB和NBT組織化學染色,發現噴施ddH2O的葉片染色程度較淺,而噴施AOS的葉片染色程度較深,且在24h時染色深。qRT-PCR檢測ROS合成基因RbohA、RbohB以及去除基因SOD、APX和CAT表達水平,顯示RbohB基因表達量明顯上調,CAT基因表達量明顯下降,說明AOS可以通過抑制CAT基因和促進RbohB基因的表達,提高過氧化氫的積累。褐藻寡糖在誘導植物抗病活性方面，能夠激發植物體的防御活性，提高植物的生命活力及抗病性能。西藏褐藻寡糖廠

褐藻膠寡糖對植物來說也是一種重要的信號分子，能夠參與植物的生長調節和誘導抗病過程。遼寧褐藻寡糖凝膠

    褐藻寡糖對煙C葉片葉綠素含量的影響葉綠素是高等植物進行光合作用的主要成分,葉綠素損失或者破壞會嚴重影響植物生長發育進程,在某種程度上葉綠素含量多少表征著植物健康程度。圖3和圖4是煙C葉片中葉綠素a和葉綠素b在噴施褐藻寡糖后的變化結果。研究發現:經過6h低溫脅迫,水處理組葉綠素a和b含量分別下降了23.9%和6.0%,隨著時間延長,2種葉綠素含量繼續減少,48h后分別只有對照的51.2%和78.3%,說明在低溫脅迫下,水處理組葉綠素受到低溫損傷破壞,且隨著時間延長,破壞不斷加劇。在2種葉綠素中,葉綠素a比葉綠素b更容易受到低溫破壞。噴施了0.05%～0.30%褐藻寡糖后進行低溫脅迫,煙C葉片葉綠素a和b含量比水處理組有不同程度升高,表明此濃度范圍內寡糖能夠減輕低溫對葉綠素的損傷,其中以0.20%寡糖溶液效果明顯,但0.10%褐藻寡糖處理組在48h時葉綠素a和b的含量都有較大幅度下降,表明葉綠素受到破壞損傷;高濃度1.00%褐藻寡糖對煙C起破壞作用,與對照組相比,葉綠素a和b含量都有較大幅度減少,隨時間延長,二者含量繼續降低,表明煙C葉綠素損傷加劇。遼寧褐藻寡糖凝膠

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