上周，我們后臺有收到小伙伴私信問：做制備液相實驗時，流動相使用前為什么要脫氣?“流動相使用前先脫氣”是老師反復強調、標準操作規程里明確標注的步驟，但很多人對其背后的原理和重要性可能一知半解，甚至想偷懶。所以，本周小編決定來和大家嘮一嘮！一、流動相里藏著“隱形氣泡”？我們常用的流動相（比如甲醇、水、乙腈等體系，或含緩沖鹽的溶液），即便看起來澄清透明，其實都溶解了一定量的空氣，會在你的色譜系統中引發一系列棘手的問題，直接影響分析的準確性、穩定性和儀器壽命。二、偷懶=隱患，不可取想過偷懶的小伙伴這一趴是重點：1、壓力不穩+基線噪音現象：色譜基線劇烈漂移、出現毛刺或假峰，泵的輸出壓力忽高忽低。元兇：流動相中的氣泡在高壓泵工作時，會被壓縮和釋放，產生脈沖，導致流速不穩定。這些氣泡流經檢測器時，會引起劇烈波動，產生噪音。后果：嚴重影響數據的準確性，特別是在檢測低濃度樣品時，信號可能被完全淹沒在噪音中，白忙活一場。2、峰形畸變+分離失效現象：目標峰拖尾、展寬、分叉，甚至出現“肩峰”。元兇：微小的氣泡進入色譜柱后，相當于“堵塞”了部分固定相通道，導致流動相流速不均、傳質效率下降。后果：色譜柱的分離效率下降。 追求科研重現性？萬立制備液相秉承匠心工藝，確保每次純化結果穩定一致，讓您的研究結論堅實可靠。江蘇萬立中高壓液相色譜產品介紹

    在液相色譜（尤其是反相液相色譜）分析中，梯度洗脫是解決復雜樣品（多組分、極性差異大）分離的重要手段。相較于等度洗脫，梯度洗脫通過連續改變流動相有機相比例，可靈活調節組分保留時間、改善峰形、縮短分析周期，但梯度條件設置不當易導致分離度不足、鬼峰、基線漂移等問題。以下從優化原則、主要參數技巧、實戰場景策略、常見問題規避四個維度，系統梳理梯度優化方法。一、梯度優化的主要原則：先“穩”后“優”梯度優化的本質是通過控制有機相（如乙腈、甲醇）比例的變化速率，讓不同極性的組分在合適的保留時間窗內實現“既不早出（峰重疊）、也不晚出（峰展寬）”，主要遵循3大原則：匹配組分極性差異：極性差異大的樣品（如同時含強極性雜質與弱極性目標物）需更寬的梯度范圍；極性接近的樣品則用窄梯度范圍，避免過度洗脫。平衡分離度與效率：優先保證關鍵組分（如相鄰峰、目標物與雜質）的分離度（R≥），再通過優化梯度速率縮短分析時間，避免“為快失準”。兼顧系統穩定性：梯度變化需平緩過渡，避免有機相比例驟升驟降，減少溶劑混合帶來的氣泡、基線漂移，同時保護色譜柱（避免固定相突然收縮/膨脹）。江蘇國產液相色譜產品介紹萬立制備液相色譜儀，以專業分離純化性能，助您輕松攻克復雜樣品挑戰，收獲超高純度目標產物。

    制備液相色譜柱正確使用方法（附萬立演示視頻）“色譜柱”各位實驗員們應該經常和它打交道吧，作為制備液相色譜實驗的“心臟”，其初始狀態直接決定分離精度與使用壽命，本期，我們就帶大家拆解新柱試用的全流程，文中附上萬立儀器實操演示，新手也能一次搞定！一、色譜柱試用前，請務必做好以下準備：1、檢查色譜柱外觀：觀察柱體是否有磕碰變形，兩端接口螺紋是否完好，若有包裝破損，立即聯系廠商更換。2、查看標簽：重點記錄3個關鍵參數——耐受壓力、pH耐受范圍、尺寸。3、沖洗儀器：在安裝之前，先沖洗儀器管路，要保證系統管路中是沒有雜質的狀態，無緩沖鹽等，防止污染新的色譜柱。4、檢查系統連接：確保所有管路接頭緊密，無泄漏。5、流動相與樣品準備：①盡量使用流動相溶解樣品。②使用色譜純試劑和超純水，并經過μm或更小孔徑濾膜過濾和脫氣。二、主要步驟：沖洗和平衡（含視頻演示）新柱出廠時殘留的生產溶劑等雜質，可能會導致基線噪聲和鬼峰。必須通過沖洗去除雜質，再用流動相平衡固定相，這步是試用成功的關鍵。1、活化與平衡①可以先用100%的甲醇或者乙腈沖洗，選擇小流速（20ml/min)，沖洗10-20倍柱體積；②再用甲醇：水或者乙腈：水（1：1）。

在中藥有效成分分離中，自動進樣器可連續處理200針樣品，每針進樣量達2mL，大幅提升制備效率。四、應用版圖：從實驗室到中試的關鍵橋梁快速制備液相色譜儀的應用貫穿科研與生產鏈條，在不同領域展現獨特價值：1.天然產物分離：活性成分的高效挖掘2.藥物研發：雜質控制與標準品制備3.有機合成：反應中間體的規模化制備4.生物大分子：多肽與蛋白的分離純化從實驗室的毫克級純化到中試車間的克級生產，快速制備液相色譜儀以“效率與純度并重”的技術特質，架起了從分析到制備的橋梁。隨著智能化、綠色化技術的深入，它將不僅是分離工具，更會成為推動創新藥物、功能材料等領域發展的重要引擎。注：以上內容只是作為科普。制備液相難題，萬立儀器為您巧妙來化解。

    二、關鍵梯度參數的優化技巧梯度洗脫的主要參數包括初始有機相比例、梯度斜率（變化速率）、梯度范圍、平衡時間、終梯度維持時間，每個參數的微調都直接影響分離效果，需針對性優化：1.初始有機相比例：決定“早出峰”的分離基礎初始有機相比例（梯度起始時，乙腈/甲醇等有機相占流動相的體積百分比）直接影響強極性組分的保留行為，是避免“早出峰重疊”的關鍵。優化邏輯：若初始有機相比例過高（如50%乙腈）：強極性組分保留弱，易在死體積附近扎堆出峰，導致重疊；若初始有機相比例過低（如5%乙腈）：強極性組分保留過強，出峰過晚，峰展寬嚴重，且分析時間延長。實戰技巧：初篩方法：先采用“寬范圍梯度預實驗”確定初始比例——例如對未知樣品，用“5%-95%乙腈（水相為），30分鐘梯度”運行，觀察較早出峰組分的保留時間：若早出峰組分在1-2分鐘內（接近死時間）：說明初始比例過高，需降低（如從5%降至3%或2%）；若早出峰組分在5分鐘后：說明初始比例過低，需升高（如從5%升至8%或10%）。關鍵組分優先：若樣品中存在強極性關鍵雜質（如目標物前體），需確保其初始保留時間≥2倍死時間（t?），避免與溶劑峰重疊（死時間可通過進樣尿嘧啶、硫脲等無保留物質測定）。制備液相色譜儀在保證高性能的同時，著力控制成本，為用戶提供高性價比選擇。智能液相色譜品牌

萬立儀器價格相較進口設備更親民，能幫企業節省大量采購成本，卻依然具備出色的檢測分析性能 。江蘇萬立中高壓液相色譜產品介紹

準確度與穩定性是制備色譜儀的重要指標，進口儀器雖表現優異，但在復雜樣品基質下易出現重現性差、雜質識別不準等問題，且價格昂貴。萬立儀器針對這一痛點，以技術創新筑牢性能根基：自主研發。針對國內復雜樣品檢測需求，優化軟件算法，支持自定義分離方法，通過10000小時連續運行測試，儀器穩定性誤差小于1%，重現性RSD值低于0.5%，達到國際同等水平，某科研機構使用該儀器進行分離純化實驗，重現性較進口儀器提升20%，雜質識別準確率達99.8%，且采購成本降低40%，成為兼顧可靠性能與高性價比的較好方案。江蘇萬立中高壓液相色譜產品介紹