CD41(GP IIb,整合素αIIb亞基)與CD61(GP IIIa,整合素β3亞基)以非共價鍵結合,形成血小板表面含量很豐富的整合素異二聚體——αIIbβ3,即GP IIb/IIIa復合物。此復合物是血小板聚集的很終共同通路。在靜息血小板表面,GP IIb...
除了止血,血小板已被普遍認為是先天免疫系統的重要參與者,膜糖蛋白是其免疫功能的分子基礎。CD62P介導與免疫細胞的直接對話。GP IIb/IIIa和GP Ib可通過結合補體成分、細菌或病毒,參與病原體識別。更值得注意的是,血小板能表達MHC I類分子,并能通過...
適配體是通過SELEX技術篩選得到的單鏈DNA或RNA分子,能高親和力、高特異性結合靶標。將適配體與均相發光技術結合,產生了新型生物傳感器。例如,可以設計一個分子信標式適配體:其兩端分別標記熒光供體和淬滅基團,在沒有靶標時結構閉合,FRET發生,信號淬滅;結合...
Alpha技術,又稱均相臨近化學發光檢測,是均相發光領域的一項變革性突破。該技術基于兩種特殊的微珠:供體珠(Donor Bead)和受體珠(Acceptor Bead)。供體珠內包裹了光敏劑,當被680nm激光激發時,可將周圍環境中的氧氣轉化為高能態的單線態氧...
盡管優勢明顯,均相發光技術也存在一些挑戰和局限性。首先,某些技術(如FRET)可能受到樣本自身顏色(如血紅蛋白)、濁度或某些化合物(如具有強熒光或淬滅特性的藥物)的光學干擾。其次,均相檢測通常對試劑的特異性和純度要求極高,任何非特異性結合或聚集都可能導致假陽性...
在生物制藥(如單克隆抗體、重組蛋白)的生產過程中,均相發光技術被普遍用于工藝開發和質量控制。例如,使用基于Protein A或抗原的均相免疫分析,快速定量細胞培養上清或純化過程中的抗體滴度。也可以使用針對特定宿主細胞蛋白(HCP)或Protein A殘留的均相...
除了基于熒光的能量轉移,均相檢測也可利用化學發光能量轉移(CRET)。在CRET中,供體是化學發光反應(如魯米諾-過氧化物酶反應)產生的激發態分子,其發出的光能直接激發鄰近的熒光受體發出更長波長的光。通過設計使受體標記在結合事件的另一方,即可實現均相檢測。電化...
除了止血,血小板已被普遍認為是先天免疫系統的重要參與者,膜糖蛋白是其免疫功能的分子基礎。CD62P介導與免疫細胞的直接對話。GP IIb/IIIa和GP Ib可通過結合補體成分、細菌或病毒,參與病原體識別。更值得注意的是,血小板能表達MHC I類分子,并能通過...
適配體是通過體外篩選得到的單鏈DNA/RNA分子,能特異性結合小分子、蛋白質甚至細胞。將適配體的高特異性與均相化學發光的高靈敏度結合,催生了新型生物傳感器。設計策略包括:構象開關型:適配體與化學發光標記物(如吖啶酯)和淬滅基團相連,結合靶標后構象變化,改變發光...
適配體是通過SELEX技術篩選得到的單鏈DNA或RNA分子,能高親和力、高特異性結合靶標。將適配體與均相發光技術結合,產生了新型生物傳感器。例如,可以設計一個分子信標式適配體:其兩端分別標記熒光供體和淬滅基團,在沒有靶標時結構閉合,FRET發生,信號淬滅;結合...
CD62P,即P-選擇素,是一種細胞黏附分子,儲存于靜息血小板的α顆粒和內皮細胞的Weibel-Palade小體內。當血小板受到強激動劑(如凝血酶、膠原)刺激時,α顆粒迅速與質膜融合,將其內容物(如血小板因子4、β-血小板球蛋白等)釋放入周圍環境,同時將CD6...
在生理性止血與病理性血栓形成過程中,前述膜糖蛋白并非孤立行動,而是構成一個精密有序的級聯反應網絡。以動脈血栓形成為例:血管損傷后,血小板首先通過CD42b-vWF相互作用在內皮下“錨定”。緊隨其后的牢固黏附和血小板活化啟動,涉及多種受體(如膠原受體GP VI等...
鑒于GP IIb/IIIa在血小板聚集中的終末地位,它成為抗血小板藥物研發的較早成功靶點。以阿昔單抗、替羅非班、依替巴肽為象征的GP IIb/IIIa受體拮抗劑,通過競爭性或非競爭性阻斷該受體與纖維蛋白原的結合,強力抑制血小板聚集,普遍應用于經皮冠狀動脈介入診...
盡管血小板CD45的功能尚不完全清晰,但現有研究提示其可能作為一個重要的“調節器”。作為一種PTPase,CD45可通過去磷酸化作用,負調控Src家族激酶的活性。Src激酶參與多個血小板活化通路,包括GP VI/FeRγ鏈復合物(膠原受體)和CLEC-2受體(...
在臨床診斷和生物研究中,經常需要同時檢測一個樣本中的多個指標。均相發光技術可以通過多種策略實現多重分析。空間編碼:在不同的微孔或區域進行不同檢測。光譜編碼:使用發射不同波長熒光的多種受體(如不同鑭系元素供體搭配不同顏色受體),通過檢測不同波長通道的信號來區分不...
鑒于GP IIb/IIIa在血小板聚集中的終末地位,它成為抗血小板藥物研發的較早成功靶點。以阿昔單抗、替羅非班、依替巴肽為象征的GP IIb/IIIa受體拮抗劑,通過競爭性或非競爭性阻斷該受體與纖維蛋白原的結合,強力抑制血小板聚集,普遍應用于經皮冠狀動脈介入診...
血小板由骨髓巨核細胞胞質分割產生。在其生成與成熟過程中,膜糖蛋白的表達經歷程序性變化。巨核細胞前體即開始表達GP IIb/IIIa(CD41/CD61)和GP Ib-IX-V復合物,它們是巨核細胞系的特異性標志。GP IIb/IIIa的表達早于GP Ib,且兩...
在傳染病診斷領域,均相發光技術主要用于抗原或抗體的高靈敏檢測。例如,利用TR-FRET原理,可以設計檢測病毒抗原的均相免疫分析。將針對病毒抗原不同表位的兩種抗體分別標記供體和受體,樣本中若存在病毒抗原,則形成免疫復合物并產生FRET信號。該方法快速,可用于病原...
在生物制藥(如單克隆抗體、重組蛋白)的生產過程中,均相發光技術被普遍用于工藝開發和質量控制。例如,使用基于Protein A或抗原的均相免疫分析,快速定量細胞培養上清或純化過程中的抗體滴度。也可以使用針對特定宿主細胞蛋白(HCP)或Protein A殘留的均相...
Alpha(Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay)技術是均相化學發光的典范。其供體珠中裝載光敏劑,在680nm激光激發下,將周圍環境中的氧分子轉化為高能量、短壽命(約4微秒)的單線態氧。單線態氧在溶...
生物發光共振能量轉移(BRET)是一種天然的或工程化的均相檢測技術。它利用生物發光蛋白(如海腎熒光素酶Rluc)作為供體,催化底物(如腔腸素)產生化學發光,該能量直接轉移給鄰近的熒光蛋白(如GFP、YFP)受體,使其發出熒光。BRET無需外部光源激發,完全消除...
適配體是通過體外篩選得到的單鏈DNA/RNA分子,能特異性結合小分子、蛋白質甚至細胞。將適配體的高特異性與均相化學發光的高靈敏度結合,催生了新型生物傳感器。設計策略包括:構象開關型:適配體與化學發光標記物(如吖啶酯)和淬滅基團相連,結合靶標后構象變化,改變發光...
膜糖蛋白的功能不僅取決于其蛋白質骨架,還深受其糖基化修飾的影響。CD42b(GP Ibα)的N端富含亮氨酸重復區和糖基化區域,其糖鏈(尤其是硫酸化酪氨酸)對于vWF結合至關重要。GP IIb/IIIa的糖基化狀態也影響其構象和配體結合能力。此外,作為配體的P-...
相較于熒光或比色法,化學發光作為均相檢測的信號系統具有多重獨特優勢。首先,它無需外部激發光源,從而完全避免了光源不穩定、樣本自發熒光及光散射所帶來的背景干擾,理論上能獲得極高的信噪比和靈敏度。其次,化學發光反應產生的光子信號強度在一定范圍內與反應物濃度直接相關...
熱遷移分析(Cellular Thermal Shift Assay, CETSA)是一種研究靶點與藥物在細胞水平結合情況的技術。其原理是藥物結合會改變靶蛋白的熱穩定性。傳統的CETSA依賴蛋白質印跡法檢測,通量低。現在,通過與均相發光免疫檢測(如Alpha)...
報告基因(如熒光素酶、β-半乳糖苷酶)是研究基因表達調控的常用工具。傳統的報告基因檢測通常需要細胞裂解和底物孵育多步操作。均相發光報告基因檢測系統通過使用具有細胞膜滲透性的“前底物”(pro-substrate)或優化反應條件,實現了“一步加樣”檢測。例如,某...
在造血干細胞移植和再生醫學領域,CD41和CD61是重要的表面標志物。CD41(GP IIb)的表達是造血干細胞向巨核細胞-血小板譜系定向分化的十分早、十分特異的標志之一。通過流式細胞術分選CD34+造血祖細胞中CD41+的細胞群體,可富集巨核細胞前體。在體外...
IL-6 是一種多效性的細胞因子,參與急性期反應、免疫應答和造血等過程。浦光生物的IL-6化學發光檢測是其細胞因子陣列中具有高臨床價值的項目之一。IL-6是膿毒癥、細胞因子釋放綜合征(CRS,如CAR-T診療相關)、COVID-19重癥化、類風濕關節炎等疾病中...
CD42a 是血小板糖蛋白Ib-IX-V復合物中的一個重要成員。 浦光生物將其納入血小板檢測套餐,凸顯了其在診斷全面性上的考量。 該復合物是血管性血友病因子(vWF)的主要受體,介導血小板與受損血管內皮的初始粘附。 針對CD42a的化學發光檢測,能夠揭示該復合...
浦光生物憑借其一體化的化學發光分析系統,依托于創新的鄰位觸及化學發光共振能量轉移技術——CRET技術,成功地將CD62P 等血小板活化標志物的檢測從科研級的流式細胞術推向常規臨床實驗室的自動化平臺。 這一整合意味著實驗室無需依賴復雜的流式細胞儀和專門的操作人員...