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甘肅FabULOUSIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-10-02

Genovis是一家瑞典生物技術(shù)公司,自2010年起,為生物制藥公司提供SmartEnzymes工具酶。Genovis提供一系列獨(dú)特、快速且易于使用的酶學(xué)工具,主要用于生物制藥行業(yè)和學(xué)術(shù)界。我們?cè)谌蚍秶鷥?nèi)提供創(chuàng)新的智能酶SmartEnzymes?,用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制。您可以在我們的網(wǎng)站上“Application頁(yè)面”獲得更多應(yīng)用信息,如果您有興趣,可以和我們一起做一個(gè)“SmartStories”,也可以聯(lián)系我們。IgASAP Sub1+2 特異性消化鉸鏈上方的 IgA1 和 IgA2m1,產(chǎn)生完整且均質(zhì)的 Fab 和 Fc 片段。甘肅FabULOUSIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)

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與IdeS不同,融合蛋白是通過(guò)將兩種或多種蛋白質(zhì)或肽的功能組合成一個(gè)量身定制的分子來(lái)創(chuàng)造的,以專門(mén)應(yīng)對(duì)挑戰(zhàn)。連接此類蛋白質(zhì)或肽結(jié)構(gòu)域的常見(jiàn)方法是包含柔性連接子。這些連接子通常富含甘氨酸,例如甘氨酸殘基(G),或甘氨酸殘基散布絲氨酸殘基(GS)以形成重復(fù)序列。這為連接子提供了足夠的靈活性,不會(huì)干擾連接蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域的功能。然而,這些新模式帶來(lái)了新的分析挑戰(zhàn),需要新的工具來(lái)促進(jìn)表征和產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)。中級(jí)分析已成為分析單克隆抗體療法的標(biāo)準(zhǔn)方法,涉及將分子消化成幾個(gè)定義的亞基。它們足夠小,可以獲得高質(zhì)量的質(zhì)譜圖,并為產(chǎn)品質(zhì)量屬性提供特定領(lǐng)域的信息。由于G和GS連接子對(duì)常見(jiàn)蛋白酶的降解具有抗性,因此很難分離結(jié)構(gòu)域以進(jìn)行深入分析。因此,Genovis開(kāi)發(fā)了GlySERIAS,不同于IdeS酶,一種消化柔性富含甘氨酸的連接子的酶。GlySERIAS可以分離不同的功能域,并實(shí)現(xiàn)對(duì)融合蛋白、多特異性抗體和含有富含甘氨酸的連接子的各種mAb片段進(jìn)行詳細(xì)表征的中級(jí)方法。湖南FabRICATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶Genovis已經(jīng)測(cè)試了 PBS 和 150 mM 醋酸銨,并且也適用于FabRICATOR HPLC。

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Genovis集團(tuán)由瑞典GenovisAB和美國(guó)全資子公司GenovisInc.組成。該公司在納斯達(dá)克上市。如需了解更多信息,請(qǐng)?jiān)L問(wèn)投資者關(guān)系。Genovis的經(jīng)營(yíng)理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具,以促進(jìn)和節(jié)省開(kāi)發(fā)新治療方法和診斷的時(shí)間。Genovis酶產(chǎn)品,稱為SmartEnzymes,被世界各地的科學(xué)家使用,創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進(jìn)了生物藥物的開(kāi)發(fā)和質(zhì)量控制。通過(guò)在2020年收購(gòu)QEDBioscience,產(chǎn)品組合已擴(kuò)大到包括用于研究、生物藥物開(kāi)發(fā)和診斷檢測(cè)的抗體和試劑。在官網(wǎng)上閱讀有關(guān)QED的更多信息Genovis研發(fā)活動(dòng)的基石是客戶關(guān)系,使產(chǎn)品開(kāi)發(fā)能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶、開(kāi)發(fā)新工作流程和新靶點(diǎn)抗體的學(xué)術(shù)團(tuán)體的合作同樣有價(jià)值。

用于IgA1和IgA2m1以上鉸鏈消化的凍干酶。與IdeS不同,Genovis提供的IgASAPSub1+2在鉸鏈上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgA1和IgA2m1,產(chǎn)生完整且均勻的Fab和Fc片段。由于人IgA1的鉸鏈比IgA2的鉸鏈長(zhǎng),因此IgA1和IgA2m1之間來(lái)自消化位點(diǎn)的氨基酸C末端不同。IgASAPSub1+2可消化分泌物和血清IgA。孵育時(shí)間為過(guò)夜(16-18小時(shí)),并且由于酶的特異性,沒(méi)有過(guò)度消化的風(fēng)險(xiǎn)。該酶在pH值為6.0至8.0時(shí)具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可產(chǎn)生活性。活性為37°C。IgASAPSub1+2是從丹毒梭菌克隆而來(lái)的,并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為131kDa。IgASAPSub1+2凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個(gè)單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1和IgA2m1。Blinatumomab(一種對(duì) CD19 和 T 細(xì)胞標(biāo)志物 CD3 具有特異性的 BiTE 分子)。

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Genovis的FabRICATOR MagIC自動(dòng)樣品制備可用于分析和監(jiān)測(cè)不同的CQA。mAb在生產(chǎn)或儲(chǔ)存過(guò)程中的氧化就是這樣一種CQA,可能會(huì)影響zhiliao產(chǎn)品的質(zhì)量。為了展示FabRICATOR MagIC如何解決這個(gè)問(wèn)題,對(duì)6種mAb的混合物進(jìn)行強(qiáng)制降解(室溫下3個(gè)月),并通過(guò)反相LC-MS進(jìn)行分析。當(dāng)在完整水平上分析mAb時(shí),可以檢測(cè)到mAb5豐度的顯著差異,同時(shí)出現(xiàn)許多新的峰。然而,無(wú)法獲得可靠的質(zhì)量數(shù)據(jù)。使用FabRICATOR MagIC,mAb5變化的來(lái)源在Fab區(qū)域內(nèi)。隨后還原為 Fc/2、LC 和 Fd' 片段,可以識(shí)別差異是由于 mAb5 Fd' 片段上的色氨酸氧化,通過(guò)形成氧代內(nèi)酯 (+14 Da) 和二氧代內(nèi)酯 (+30 Da) 以及 mAb5 LC (-18 Da) 的琥珀酰亞胺化來(lái)揭示。此外,還可檢測(cè)到mAb3輕鏈的異構(gòu)化。該示例說(shuō)明了FabRICATOR MagIC在mAb中級(jí)分析中的強(qiáng)大功能,它創(chuàng)建的片段足夠小,可以精確定位特定的修飾,而無(wú)需耗時(shí)耗費(fèi)資源的肽圖分析,所有這些都以相對(duì)較少的手動(dòng)操作時(shí)間快速完成。這正是您使用FabRICATOR(IdeS蛋白酶)可以得到的。甘肅FabULOUSIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)

Genovis還提供了在瓊脂糖樹(shù)脂上固定化的酶,在隨時(shí)可用的離心柱中,這可以大限度地減少在樣品中殘留的酶。甘肅FabULOUSIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)

與IdeS不同,Genovis的GlySERIAS是一種獨(dú)特的酶,可消化柔性富含甘氨酸的融合蛋白連接子,例如Gly4Ser和GlyxSery(GS)以及聚甘氨酸(G)接頭。該酶能夠分離多功能融合蛋白的各個(gè)結(jié)構(gòu)域,以促進(jìn)表征并增加對(duì)這些分子的理解。融合蛋白的中級(jí)分析既可以降低整體樣品的復(fù)雜性,又可以對(duì)翻譯后修飾進(jìn)行結(jié)構(gòu)域特異性鑒定和監(jiān)測(cè)。為了改善連接子的去除,Genovis建議使用GlySERIASImmobilized。對(duì)于連接子表征,我們推薦GlySERIAS凍干。具有柔性接頭的獨(dú)特酶消化融合蛋白;中級(jí)方法可降低融合蛋白表征的復(fù)雜性;復(fù)雜融合蛋白的可靠且可重復(fù)的消化。Genovis的GlySERIAS酶切由甘氨酸或甘氨酸和絲氨酸殘基的重復(fù)序列組成的柔性連接子。該酶在天然反應(yīng)條件下具有活性,能夠?qū)?fù)雜的融合蛋白進(jìn)行中級(jí)表征。連接子區(qū)域同時(shí)在多個(gè)位點(diǎn)被消化,導(dǎo)致先前連接的組分分離?;钚园l(fā)生在pH7.6下,孵育時(shí)間可以根據(jù)所需的產(chǎn)物而變化。GlySERIAS是從噬菌體K克隆而來(lái)的,在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為18kDa。甘肅FabULOUSIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)

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