羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)是一種不能輕易穿過生物膜的緩沖。 它適用于伊立替康脂質體,因為它可以在穩定脂質體外水相酸堿度為弱堿性的情況下,不改變內水相酸性酸堿度。HEPES 的用量應該在10-25mM 之間,10mM以下的用量會導致緩沖能力較弱, 25mM以上可能對一些細胞造成不良反應。HEPES的使用以及操作應盡量在避光的情況下進行。這是因為在燈光下,HEPES會產生H2O2,而H2O2對活性的物體來說是有害的,這對培養的細胞會造成一定的傷害。
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HEPES緩沖體系的應用
2022年4月15日,施維雅公司(SERVIER)宣布,其胰腺****藥物易安達(通用名:鹽酸伊立替康脂質體注射液)獲得中國國家藥品監督管理局(NMPA)正式批準上市。
伊立替康**早上市的制劑是鹽酸伊立替康注射液,在實際使用的過程中,該劑型逐漸暴露出一個問題:伊立替康的內酯環結構易水解,在pH>6條件下平衡快速向羧酸鹽型方向轉化。羧酸鹽型的伊立替康藥理活性低,毒性更強。生理條件(pH 7.4)下,由于血清蛋白優先與羧酸鹽絡合而使平衡偏向活性低的羧酸型,造成有效的內酯型比例過低,達到平衡時,“低效高毒”的羧酸鹽形式化合物所占比重高達90%。
q中包裹的伊立替康以有效的內酯型為主,這也意味著伊立替康脂質體內水相pH偏酸性(pH6左右)。而眾多文獻及Onivyde專利文件實施例均表明外水相pH在近中性時更有利于脂質的穩定,Onivyde專利文件的實施例表明外水相pH在7.25左右時脂質長期穩定性比較好。這需要伊立替康脂質體外水相和內水相存在pH差異,同時外水相偏堿性的緩沖對不能在長期儲存中進入內水相升高內水相pH,否則內水相中的伊立替康將會轉化為“低效高毒”的羧酸鹽形式。四、不易穿過脂質膜的羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)更適用于伊立替康脂質體
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使用注射級氨丁三醇緩沖劑的注意事項:1.Tris緩沖液的pH值受溫度影響大,△pKa/℃=-0.031,例如:4℃時緩沖液的pH=8.4,則37℃時的pH=7.4,所以一定要在使用溫度下進行配制,室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃~4℃。2.Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大,緩沖液稀釋十倍,pH值的變化大于0.13.Tris在一定程度上與各種分子反應,包括RNA酶抑制劑,醛,酶,DNA以及常見金屬如Cr3+,Fe3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,在有些系統中會起抑制作用,在配制過程中需考慮與其他組分之間的相互作用;4.Tris緩沖液易吸收空氣中的CO2,配制的緩沖液要注意蓋嚴密封;5.Tris緩沖液對某些pH電極發生一定的干擾作用,需使用與注射級氨丁三醇溶液具有兼容性的電極;6.Tris緩沖液不適用于二喹啉甲酸(BCA)測定;7.吸入,攝入,皮膚吸收注射級氨丁三醇可造成傷害,操作時需戴好手套和護目鏡;8.作為蛋白緩沖液時,若后續工作需要質譜,則不適宜用注射級氨丁三醇,比較好換成其他質譜儀可耐受的緩沖液。
HEPES的化學結構與基本特性?HEPES是一種兩性離子緩沖劑,化學式為C8H18N2O4S,分子量238.3 g/mol。其pKa值為7.5(25℃),在pH 6.8-8.2范圍內具有優異的緩沖能力。作為Good's緩沖液家族成員,HEPES對細胞無毒性,且不與金屬離子螯合,適合含金屬離子的實驗體系。其水溶性(>1 M)和低滲透壓特性使其成為細胞培養的理想選擇。艾偉拓HEPES現已登記且狀態為A,歡迎采購!HEPES在細胞培養中的應用?HEPES***用于哺乳動物細胞培養,尤其在CO2培養箱外操作時(如顯微鏡觀察),可替代碳酸氫鹽緩沖系統。推薦濃度為10-25 mM,過高濃度可能抑制細胞生長。需注意HEPES對光敏感,需避光保存。注射用HEPES緩沖液中美雙報高性價比。

HEPES,全稱為4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸,又名N-(2-羥乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸或N-2-Hydroxyethylpiperazine-N-2-EthaneSulfonicAcid,是一種在生物化學和分子生物學領域中廣泛應用的化學物質。以下是對HEPES的詳細介紹:配制方法單一HEPES溶液:可以配制單純的HEPES+NaOH溶液。例如,要配制500ml 1M HEPES,pH=7.0的溶液,可以將119.15g HEPES溶解在400ml蒸餾水中,加0.51M的NaOH水溶液調節至所需pH(HEPES的有效pH范圍是6.88.2),然后用蒸餾水定容至500ml,于4攝氏度保存。HEPES+鹽溶液:也可以配制含有其他成分的HEPES溶液。例如,將HEPES、NaCl、Na2HPO4·7H2O等按一定比例溶解在蒸餾水中,用NaOH調節pH值后定容。注射用HEPES緩沖液中美雙報。江西登記號HEPES現貨
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二、藥用功能與應用緩沖作用:HEPES在pH值為6.8~8.2的范圍內具有良好的緩沖能力,能夠維持溶液pH的穩定。在藥用輔料中,HEPES常用于制備各種注射劑、口服液等制劑,以確保藥物在儲存和使用過程中pH值的穩定。細胞保護作用:HEPES對細胞無毒性作用,且能夠降低某些化學物質的細胞毒性。在細胞培養中,HEPES能夠維持細胞的正常形態和功能,提高細胞的生存率。促進藥物吸收:作為促透劑,HEPES能夠促進藥物分子通過皮膚或黏膜的吸收,提高藥物的生物利用度。其他應用:HEPES還用于制備各種生化試劑盒、診斷試劑等,為醫藥產品的質量和安全性提供保障。在某些特定的藥物制劑中,HEPES還起到穩定劑、增溶劑等作用。廣東大批量HEPES批量