ROX熒光定量PCR儀配備530/570nm檢測模塊,兼容ROX染料,其重要優(yōu)勢在于可校正樣本間熒光信號差異。在多重PCR實驗中,不同反應(yīng)孔的熒光信號強度可能因試劑添加量、反應(yīng)體積等因素產(chǎn)生偏差,ROX染料作為被動參考染料,其熒光強度與反應(yīng)總體積相關(guān),通過計算ROX信號與靶標(biāo)熒光信號的比值,可消除樣本間差異,提升定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。例如,某研究利用ROX熒光定量PCR儀檢測乙型肝炎病毒(HBV)載量,通過ROX校正后,不同樣本的檢測結(jié)果CV值從15%降至5%,明顯提升了實驗重復(fù)性。此外,ROX通道還可兼容HEX、JOE等黃色熒光標(biāo)記,支持多通道同步檢測,滿足復(fù)雜實驗需求。如 FAM、ROX 等常用染料的通道,以實現(xiàn)多重 PCR 檢測,同時對多個目標(biāo)基因進(jìn)行定量分析。徐州EVA-Green熒光定量PCR儀市場報價

TET 熒光定量 PCR 儀針對基因拷貝數(shù)變異(CNV)檢測的需求,開發(fā)了低背景熒光抑制技術(shù),通過優(yōu)化反應(yīng)體系中的熒光淬滅劑濃度及儀器光學(xué)系統(tǒng)的激發(fā)光強度,可將非特異性熒光信號降低至檢測閾值以下(<100 RFU)。其適配的 TET 標(biāo)記引物在與靶標(biāo) DNA 結(jié)合后,可通過引物延伸過程釋放熒光信號,避免了探針法中探針設(shè)計難度高的問題,尤其適合復(fù)雜基因組區(qū)域(如重復(fù)序列區(qū))的 CNV 檢測。在臨床染色體異常檢測中,例如 21 三體綜合征(唐氏綜合征)的產(chǎn)前篩查,該儀器可通過檢測胎兒游離 DNA 中 21 號染色體特異性基因的拷貝數(shù),與正常二倍體樣本進(jìn)行對比,實現(xiàn)拷貝數(shù)差異的精細(xì)量化。實驗數(shù)據(jù)表明,該儀器對 CNV 檢測的分辨率可達(dá) 0.5 個拷貝差異,準(zhǔn)確率高于 99%,且檢測時間需 1.5 小時,滿足臨床快速篩查的需求。江蘇JOE熒光定量PCR儀詢問報價擁有高靈敏度的光學(xué)檢測系統(tǒng),能夠精確檢測 TET 等熒光染料發(fā)出的微弱熒光信號,保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

Cy5.5 熒光定量 PCR 儀的重要優(yōu)勢在于其近紅外熒光檢測能力,該波長范圍(675-730nm)可有效避開復(fù)雜組織樣本中血紅蛋白、黑色素等物質(zhì)的可見光區(qū)熒光干擾,明顯降低背景信號。其適配的 Cy5.5 標(biāo)記探針具有優(yōu)異的光穩(wěn)定性,在長時間熒光采集過程中不易發(fā)生光漂白,確保信號穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中,對于組織樣本中循環(huán) DNA(ctDNA)等低豐度靶標(biāo)檢測,該儀器通過高靈敏度光電倍增管,可捕捉到低至數(shù)十拷貝的靶標(biāo)核酸信號,解決了傳統(tǒng)可見光熒光 PCR 儀在復(fù)雜樣本中檢測靈敏度不足的問題。例如在肺早期診斷中,可通過該儀器檢測患者血液中微量的 EGFR 基因突變,為臨床早期干預(yù)提供精細(xì)依據(jù)。
FAM 熒光定量 PCR 儀以 FAM(羧基熒光素,發(fā)射波長 520nm)為重要熒光報告染料,常與 TaqMan 探針技術(shù)結(jié)合實現(xiàn)特異性檢測。其原理為:TaqMan 探針兩端分別標(biāo)記 FAM 報告染料與淬滅劑(如 TAMRA),未擴(kuò)增時淬滅劑抑制 FAM 熒光;PCR 擴(kuò)增中,Taq 酶的 5'-3' 外切酶活性切割與靶基因互補結(jié)合的探針,使 FAM 與淬滅劑分離并釋放熒光,熒光強度隨靶基因擴(kuò)增呈指數(shù)增長。該技術(shù)的重要優(yōu)勢是 “高特異性”—— 當(dāng)探針與靶基因序列完全互補時才會產(chǎn)生熒光,可有效避免引物二聚體等非特異性信號干擾。在病原體檢測領(lǐng)域應(yīng)用較廣,例如檢測中,針對 ORF1ab 基因設(shè)計 FAM 標(biāo)記探針,樣本中若存在該病毒,儀器可通過捕捉 FAM 熒光信號,在 30 個循環(huán)內(nèi)檢出陽性,Ct 值越小說明病毒載量越高,為臨床診療提供精細(xì)依據(jù)。定量熒光定量 PCR 儀的數(shù)據(jù)分析軟件具備 Ct 值自動計算、熔解曲線分析功能,可自動排除污染樣本。

熒光定量PCR儀的熔解曲線分析功能可驗證擴(kuò)增產(chǎn)物特異性,有效區(qū)分非特異性產(chǎn)物。其原理是在PCR反應(yīng)結(jié)束后,逐步升高反應(yīng)溫度,監(jiān)測熒光信號隨溫度的變化。特異性擴(kuò)增產(chǎn)物具有特定的熔解溫度(Tm值),而非特異性產(chǎn)物(如引物二聚體)的Tm值較低。通過分析熔解曲線,可判斷擴(kuò)增產(chǎn)物是否為單一特異性產(chǎn)物。例如,在基因突變檢測中,熔解曲線分析可識別單堿基突變,通過Tm值差異區(qū)分野生型和突變型基因。某研究利用該技術(shù)檢測肺相關(guān)基因突變,發(fā)現(xiàn)某突變位點的Tm值與野生型差異明顯,為個體化提供了科學(xué)依據(jù)。此外,熔解曲線分析無需開蓋操作,避免了氣溶膠污染風(fēng)險,提升了實驗安全性。準(zhǔn)確的熱循環(huán)系統(tǒng)對于保證 PCR 反應(yīng)的特異性和效率至關(guān)重要,進(jìn)而影響檢測靈敏度。揚州HEX熒光定量PCR儀詢問報價
在 PCR 反應(yīng)條件下具有較好的穩(wěn)定性,能夠保證熒光信號的穩(wěn)定輸出,從而實現(xiàn)對核酸模板的準(zhǔn)確定量。徐州EVA-Green熒光定量PCR儀市場報價
YELLOW熒光定量PCR儀通過530nm激發(fā)光源,適配HEX、JOE、VIC等黃色熒光標(biāo)記,其多色檢測能力使其在SNP分型和基因表達(dá)分析中具有廣泛應(yīng)用。該儀器采用高靈敏度光電二極管作為檢測器,可區(qū)分熒光信號的微小差異,實現(xiàn)高精度定量。在SNP分型實驗中,YELLOW通道可檢測HEX標(biāo)記的等位基因特異性探針,通過熒光信號強度差異判斷基因型。例如,某研究利用YELLOW熒光定量PCR儀對相關(guān)基因進(jìn)行分型,發(fā)現(xiàn)某SNP位點與疾病風(fēng)險明顯相關(guān),為遺傳咨詢提供了科學(xué)依據(jù)。此外,該儀器還支持FAM、Cy5等多色熒光標(biāo)記,可同時檢測多個靶標(biāo)基因,提升實驗通量。徐州EVA-Green熒光定量PCR儀市場報價