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蘇州FAM熒光定量PCR儀功能

來源: 發布時間:2025-11-28

熒光定量PCR儀的定量功能通過標準曲線法,可精確測定樣本中目標核酸的拷貝數。其原理是利用已知濃度的標準品繪制標準曲線,將樣本的Ct值代入曲線方程,計算樣本中目標核酸的初始濃度。在病毒載量檢測中,定量功能可準確測定病毒拷貝數,為疾病診斷和監測提供關鍵數據。例如,某研究利用該技術檢測HIV者血漿中的病毒載量,發現病毒載量與疾病進展明顯相關,為抗病毒方案的調整提供了科學依據。此外,定量功能還可用于轉基因成分檢測、微生物群落定量等領域,通過精確測定目標核酸的拷貝數,為相關研究提供量化數據支持??煽焖贆z測食品中的有害微生物,如大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等。蘇州FAM熒光定量PCR儀功能

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VIC 熒光定量 PCR 儀是適配 VIC 熒光探針的**檢測設備,其光學系統與 VIC 染料的激發(538nm)、發射(554nm)波長高度匹配,可高效捕獲特異性熒光信號,適用于基因分型與多靶標共檢場景。VIC 探針屬于淬滅型探針(如 TaqMan VIC 探針),具有特異性強、信號穩定的特點,在多重 PCR 中常作為次要靶標或內控基因的檢測通道,與 FAM、HEX 等染料無光譜重疊,可實現多通道同步檢測。在基因分型應用中,針對 SNP 位點設計的 VIC 標記探針與 FAM 標記探針可分別結合野生型與突變型靶序列,通過兩種熒光信號的有無判斷基因型(純合野生型、純合突變型、雜合子)Cy5.5熒光定量PCR儀哪個好對于一些難以培養或培養周期較長的細菌,熒光定量 PCR 儀可以快速檢測其特定的核酸序列,實現早期診斷。

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TET 熒光定量 PCR 儀針對基因拷貝數變異(CNV)檢測的需求,開發了低背景熒光抑制技術,通過優化反應體系中的熒光淬滅劑濃度及儀器光學系統的激發光強度,可將非特異性熒光信號降低至檢測閾值以下(<100 RFU)。其適配的 TET 標記引物在與靶標 DNA 結合后,可通過引物延伸過程釋放熒光信號,避免了探針法中探針設計難度高的問題,尤其適合復雜基因組區域(如重復序列區)的 CNV 檢測。在臨床染色體異常檢測中,例如 21 三體綜合征(唐氏綜合征)的產前篩查,該儀器可通過檢測胎兒游離 DNA 中 21 號染色體特異性基因的拷貝數,與正常二倍體樣本進行對比,實現拷貝數差異的精細量化。實驗數據表明,該儀器對 CNV 檢測的分辨率可達 0.5 個拷貝差異,準確率高于 99%,且檢測時間需 1.5 小時,滿足臨床快速篩查的需求。

定量熒光定量 PCR 儀主要支持定量與相對定量兩種模式,適配不同實驗需求。定量需先制備已知濃度的標準品(如重組質粒、體外轉錄 RNA),通過梯度稀釋后進行 PCR 擴增,生成 “標準品濃度對數 - Ct 值” 標準曲線;檢測樣本時,將樣本 Ct 值代入曲線,即可計算出靶核酸的拷貝數(如 “1×10^4 拷貝 /mL”),該模式常用于病毒載量檢測(如乙肝病毒 DNA 定量)、微生物計數等場景,需精細掌握靶標含量。相對定量則通過比較處理組與對照組的靶基因 Ct 值差異,采用 2^(-ΔΔCt) 法計算基因表達相對倍數,無需制備標準品,操作更簡便。例如在藥物研發中,檢測藥物處理組與對照組的抑制基因表達量,通過相對定量可快速判斷藥物是否上調該基因表達,為藥物療效評估提供數據支撐。兩種模式的靈活切換,使儀器既能滿足 “精細定量” 需求,也能適配 “快速比較” 場景,覆蓋科研與臨床多領域應用。先進的數據處理與分析算法能夠對檢測到的熒光信號進行精確的分析和處理。

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熒光定量 PCR 儀的多通道設計是實現高通量靶標篩查的重要技術,其硬件基礎是多組光學檢測單元,可同時兼容 4-6 種不同熒光染料(如 FAM、VIC、HEX、JOE、YELLOW 等)。每個通道配備專屬的激發光源、濾光片與探測器,通過光譜分離技術,確保不同染料的熒光信號互不干擾,實現 “一管多檢”。多通道設計的優勢在于大幅提升檢測效率:例如在產前診斷中,可同時檢測 21 三體、18 三體、13 三體相關基因(分別用 FAM、VIC、HEX 標記),一次反應完成三項篩查;在食源性致病菌檢測中,可同時檢測沙門氏菌、大腸桿菌、李斯特菌等 5-6 種致病菌,縮短檢測周期。軟件系統還支持通道靈活配置,用戶可根據檢測需求選擇通道組合,適配不同檢測項目,兼顧通用性與針對性,是科研實驗室與臨床檢測機構開展多靶標研究的重要設備。在 PCR 反應條件下具有較好的穩定性,能夠保證熒光信號的穩定輸出,從而實現對核酸模板的準確定量。蘇州Cy5.5熒光定量PCR儀檢測

受到儀器的整體性能、光學系統設計、熒光染料質量以及數據處理算法等多種因素的綜合影響。蘇州FAM熒光定量PCR儀功能

熒光定量PCR儀的熔解曲線分析功能可驗證擴增產物特異性,有效區分非特異性產物。其原理是在PCR反應結束后,逐步升高反應溫度,監測熒光信號隨溫度的變化。特異性擴增產物具有特定的熔解溫度(Tm值),而非特異性產物(如引物二聚體)的Tm值較低。通過分析熔解曲線,可判斷擴增產物是否為單一特異性產物。例如,在基因突變檢測中,熔解曲線分析可識別單堿基突變,通過Tm值差異區分野生型和突變型基因。某研究利用該技術檢測肺相關基因突變,發現某突變位點的Tm值與野生型差異明顯,為個體化提供了科學依據。此外,熔解曲線分析無需開蓋操作,避免了氣溶膠污染風險,提升了實驗安全性。蘇州FAM熒光定量PCR儀功能

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